奈米粒子用於體外標記神經膠質母細胞瘤的潛在應用 | 膠質母細胞瘤ptt
而多型性神經膠質母細胞瘤(Glioblastoma, GBM)便是因星狀膠細胞分裂時產生異常所 ... PTT test of Cy5-CSAG2@anti-EGFR and the specificity test of Raman shift ...進階搜尋學院別>成功大學>醫學院>細胞生物與解剖學研究所 電子論文尚未授權公開，紙本請查館藏目錄(※如查詢不到或館藏狀況顯示「閉架不公開」，表示該本論文不在書庫，無法取用。
)系統識別號U0026-2408201914302300論文名稱(中文)奈米粒子用於體外標記神經膠質母細胞瘤的潛在應用論文名稱(英文)Thepotentialapplicationofusingnanoparticletolabelglioblastomainvitro校院名稱成功大學系所名稱(中)細胞生物與解剖學研究所系所名稱(英)InstituteofCellBiologyandAnatomy學年度107學期2出版年108研究生(中文)吳宜璇研究生(英文)Yi-SyuanWu電子信箱[email protected]學號T96031046學位類別碩士語文別英文論文頁數77頁口試委員指導教授-司君一口試委員-陳宣燁口試委員-許鍾瑜口試委員-鄧志娟中文關鍵字神經膠質母細胞瘤 表皮成長因子接受器 功能性奈米粒子 拉曼散射 表面增強拉曼散射 雷射 光熱治療 英文關鍵字Glioblastoma EpithermalGrowthFactorReceptor(EGFR) Functionalizedgoldnanoparticles Ramanscattering Surface-enhancedRamanscattering Laser Photothermaltherapy 學科別分類中文摘要星狀膠細胞(Astrocyte)為神經膠細胞的其中一種，因形狀似星型而得其名，主要功能為供給神經細胞養分、與外被細胞(Pericyte)、血管內皮細胞一同構成血腦障壁(Blood-Brain-Barrier)的結構，保護中樞神經系統。
而多型性神經膠質母細胞瘤(Glioblastoma,GBM)便是因星狀膠細胞分裂時產生異常所產生的疾病，病理學上可見壞死組織及大量增生的血管，且因其特殊的浸潤性生長侵略正常腦組織，導致完整清除腫瘤的難度非常高，病患存活率偏低。
從腫瘤內有大量血管此一特性，加上腫瘤旁血管的血腦障壁有崩解的情形產生，而我們也可以從文獻中知道GBM細胞膜上會表現大量的表皮細胞生長因子接受器(Epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)。
因此利用這種特性，在本實驗中，我們使用外圍接上anti-EGFR抗體的功能性奈米金粒子標記腫瘤細胞，並使用光熱療法(Photothermaltherapy)殺死腫瘤細胞，達到治療的療效。
在實驗一開始，首先先以細胞染色法及西方墨點法確認大鼠GBM細胞(CNS-1)是否有大量表現EGFR，再者，我們必須確認之後要使用的功能性奈米金粒子是否具有特異性，能接上GBM細胞膜表面的EGFR，因此使用修飾過後的酵素連結免疫吸附分析法、布萊德福蛋白質定量法以及透過掃描式電子顯微鏡檢測，但這些方式無法精確的確認功能性奈米粒子的特異性，因為第一代核心-衛星金粒子叢集(core-satelliteassemblies,CSAG1)可能因結構不穩定，導致聚集及沈降的機率增高，影響實驗結果，因此第二代CSA被研發後，穩定性提升，因此在往後的實驗中會使用CSAG2來檢測特異性及應用在光熱治療。
在更進一步確認特異性的實驗中，我們使用CSAG2@anti-EGFR以及控制組CSAG2@IgG兩種奈米粒子來檢測。
實驗結果表示最適合檢測的參數為:當1.8×109個CSAG2@anti-EGFR與細胞反應3小時，再以照度410W/cm2的660nm雷射照射，每一點照射時間為1分鐘，共照射7個點，或每一點照射時間為3分鐘，共照射5個點的效果最好。
再確認CSAG2@anti-EGFR的特異性後，我們使用共培養系統將CNS-1及大鼠星狀膠細胞種在同一個96well的培養孔，藉此模擬正常細胞與癌細胞的交界處。
實驗結果顯示CSAG2@anti-EGFR增加至2.5×109個，與細胞培養3小時，再照射410W/cm2的660nm雷射能提升腫瘤細胞的死亡率至約53%左右，表示CSAG2@anti-EGFR具有運用在標記腫瘤細胞的潛力。
由於人類肉眼很難分辨正常細胞及腫瘤細胞，因此醫師及科學家們會依賴某些工具去運用在生物醫學領域中。
拉曼
)系統識別號U0026-2408201914302300論文名稱(中文)奈米粒子用於體外標記神經膠質母細胞瘤的潛在應用論文名稱(英文)Thepotentialapplicationofusingnanoparticletolabelglioblastomainvitro校院名稱成功大學系所名稱(中)細胞生物與解剖學研究所系所名稱(英)InstituteofCellBiologyandAnatomy學年度107學期2出版年108研究生(中文)吳宜璇研究生(英文)Yi-SyuanWu電子信箱[email protected]學號T96031046學位類別碩士語文別英文論文頁數77頁口試委員指導教授-司君一口試委員-陳宣燁口試委員-許鍾瑜口試委員-鄧志娟中文關鍵字神經膠質母細胞瘤 表皮成長因子接受器 功能性奈米粒子 拉曼散射 表面增強拉曼散射 雷射 光熱治療 英文關鍵字Glioblastoma EpithermalGrowthFactorReceptor(EGFR) Functionalizedgoldnanoparticles Ramanscattering Surface-enhancedRamanscattering Laser Photothermaltherapy 學科別分類中文摘要星狀膠細胞(Astrocyte)為神經膠細胞的其中一種，因形狀似星型而得其名，主要功能為供給神經細胞養分、與外被細胞(Pericyte)、血管內皮細胞一同構成血腦障壁(Blood-Brain-Barrier)的結構，保護中樞神經系統。
而多型性神經膠質母細胞瘤(Glioblastoma,GBM)便是因星狀膠細胞分裂時產生異常所產生的疾病，病理學上可見壞死組織及大量增生的血管，且因其特殊的浸潤性生長侵略正常腦組織，導致完整清除腫瘤的難度非常高，病患存活率偏低。
從腫瘤內有大量血管此一特性，加上腫瘤旁血管的血腦障壁有崩解的情形產生，而我們也可以從文獻中知道GBM細胞膜上會表現大量的表皮細胞生長因子接受器(Epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)。
因此利用這種特性，在本實驗中，我們使用外圍接上anti-EGFR抗體的功能性奈米金粒子標記腫瘤細胞，並使用光熱療法(Photothermaltherapy)殺死腫瘤細胞，達到治療的療效。
在實驗一開始，首先先以細胞染色法及西方墨點法確認大鼠GBM細胞(CNS-1)是否有大量表現EGFR，再者，我們必須確認之後要使用的功能性奈米金粒子是否具有特異性，能接上GBM細胞膜表面的EGFR，因此使用修飾過後的酵素連結免疫吸附分析法、布萊德福蛋白質定量法以及透過掃描式電子顯微鏡檢測，但這些方式無法精確的確認功能性奈米粒子的特異性，因為第一代核心-衛星金粒子叢集(core-satelliteassemblies,CSAG1)可能因結構不穩定，導致聚集及沈降的機率增高，影響實驗結果，因此第二代CSA被研發後，穩定性提升，因此在往後的實驗中會使用CSAG2來檢測特異性及應用在光熱治療。
在更進一步確認特異性的實驗中，我們使用CSAG2@anti-EGFR以及控制組CSAG2@IgG兩種奈米粒子來檢測。
實驗結果表示最適合檢測的參數為:當1.8×109個CSAG2@anti-EGFR與細胞反應3小時，再以照度410W/cm2的660nm雷射照射，每一點照射時間為1分鐘，共照射7個點，或每一點照射時間為3分鐘，共照射5個點的效果最好。
再確認CSAG2@anti-EGFR的特異性後，我們使用共培養系統將CNS-1及大鼠星狀膠細胞種在同一個96well的培養孔，藉此模擬正常細胞與癌細胞的交界處。
實驗結果顯示CSAG2@anti-EGFR增加至2.5×109個，與細胞培養3小時，再照射410W/cm2的660nm雷射能提升腫瘤細胞的死亡率至約53%左右，表示CSAG2@anti-EGFR具有運用在標記腫瘤細胞的潛力。
由於人類肉眼很難分辨正常細胞及腫瘤細胞，因此醫師及科學家們會依賴某些工具去運用在生物醫學領域中。
拉曼