瑞氏染色 | 瑞特氏染劑
瑞氏染色是目前最常用而又最簡單的染色方法。
瑞氏試劑中之酸性伊紅和鹼性美籃混合經化學作用後，變成中性之伊紅化美藍，久置後，經氧化而含有天青。
此三種 ...瑞氏染色瑞氏染色是目前最常用而又最簡單的染色方法。
瑞氏試劑中之酸性伊紅和鹼性美籃混合經化學作用後，變成中性之伊紅化美藍，久置後，經氧化而含有天青。
此三種染料分別和細胞核及漿中的NH3+和COO-等結合，使細胞核及胞漿著色。
由於系中性染料，又有緩衝液調節酸鹼度，所以細胞受染後，藍紅等顏色都較適中，核染質、胞漿及其中之顆粒顯色較為清楚。
中文名稱瑞氏染色外文名稱Wright'sstain本 質染色劑又 稱美藍-伊紅Y瑞氏染料由酸性染料伊紅（E-）和鹼性染料亞甲藍（M+）組成。
伊紅通常為鈉鹽，有色部分為陰離子。
亞甲藍（又名美藍）為四甲基硫堇染料，有對醌型和鄰醌型兩種結構。
通常為氯鹽，即氯化美藍，有色部分為陽離子。
美藍容易氧化為一、二、三甲基硫堇等次級染料（即天青）。
將適量伊紅、美藍溶解在甲醇中，即為瑞氏染料。
甲醇的作用：一是溶解美藍和伊紅；二是固定細胞形態。
染色原理既有物理的吸附作用，又有化學的親和作用。
各種細胞成分化學性質不同，對各種染料的親和力也不一樣。
如血紅蛋白、嗜酸性顆粒為鹼性蛋白質，與酸性染料伊紅結合，染粉紅色，稱為嗜酸性物質；細胞核蛋白、淋巴細胞、嗜鹼性粒細胞胞質為酸性，與鹼性染料美藍或天青結合，染紫藍色或藍色，稱為嗜鹼性物質；中性顆粒呈等電狀態與伊紅和美藍均可結合，染淡紫紅色，稱為嗜中性物質、原始紅細胞、早幼紅細胞胞質、核仁含較多酸性物質，染成較濃厚的藍色；中幼紅細胞既含酸性物質，又含鹼性物質，染成紅藍色或灰紅色；完全成熟紅細胞，酸性物質徹底消失後，染成粉紅色。
瑞氏染液配製(1)瑞氏染液配製瑞氏染料830gm或1g甲醇（AR）500ml或600ml先稱乾燥（事先放入溫箱乾燥過夜）瑞氏染料放置乳缽內，用乳棒輕輕敲碎染料成粉末，再行研磨至聽不到研芝麻聲即呈細粉末，加少許甘油或甲醇溶解研磨，使染料在乳缸內顯“一面鏡”光澤，而無染料粉粒沉著，再加較多量甲醇研磨呈一面鏡光亮，靜置片刻，將上層液體倒入一清潔儲存瓶內（最好用甲醇空瓶），再加甲醇研磨，重複數次，直至乳缽內染料及甲醇用完為止，搖勻，密封瓶口，存室溫暗處，儲存愈久，則染料溶解、分解就越好，一般儲存3個月以上為佳。
(2)緩衝液1)緩衝液作用：染色對氫離子濃度是十分敏感的，據觀察pH值的改變，可使蛋白質與染料形成的化合物重新離解。
緩衝液須保持一定的pH使染色穩定，PBS的pH一般在6.4~6.8，偏鹼性染料可與緩衝液中酸基起中和作用，偏酸性染料則與緩衝液中的鹼基起中和作用，使pH恆定。
2)緩衝液配製（pH6.4~6.8，弱酸性）：配方1：配方2：1%KH2PO430mlM/15KH2PO473.5ml1%Na2HPO420mlM/15Na2HPO426.5mlH2O(新鮮)加至1000ml置室溫黑暗處，瓶口密封，防止黴菌污染，如有污染則應報廢。
pH的影響（pH6.4～pH6.8）細胞各種成分均屬蛋白質，因蛋白質系兩性電解質，所帶電荷隨溶液pH而定，在偏酸性環境中正電荷增多，易與伊紅結合，紅細胞和嗜酸性粒細胞染色偏紅，細胞核呈淡藍色或不染色；在偏鹼性環境中負電荷增多，易與美藍結合，所有細胞呈灰藍色，顆粒呈深暗，嗜酸性顆粒呈暗褐，甚至棕黑色，中性顆粒偏粗，呈紫黑色。
稀釋染液必須用緩衝液，沖洗用水應近中性，否則可導致細胞染色呈色異常，形態難以識別，甚至錯誤。
染色方法和注意事項（1）血塗片乾透後固定，否則細胞在染色過程中容易脫落。
（2）沖洗時應以流水沖洗，不能先倒掉染液，防染料沉著在血塗片上。
沖洗時間不能過久，以防脫色。
如血塗片上有染料顆粒沉積，可滴加甲醇，然後立即用流水沖洗。
（3）染色過淡可以復染，復染時應先加緩衝液，然後加染液。
染色過深可用流水沖洗或浸泡，也可用甲醇脫色。
（4）瑞氏染色Ⅰ液由瑞氏染料、甲醇（AR級以上）和甘油組成，Ⅱ液為PBS（pH6.4～pH6.8）。
相關詞條吉姆薩染色巴氏桿菌漏出液管型中性粒細胞核左移口腔上皮細胞甲苯胺藍壞死半抗原APTT白細胞計數異型淋巴細胞李凡它試驗革蘭氏染色法白細胞嗜鹼性粒細胞嗜酸性粒細胞紅細胞沉降率血沉(ESR)流式細胞儀
瑞氏試劑中之酸性伊紅和鹼性美籃混合經化學作用後，變成中性之伊紅化美藍，久置後，經氧化而含有天青。
此三種 ...瑞氏染色瑞氏染色是目前最常用而又最簡單的染色方法。
瑞氏試劑中之酸性伊紅和鹼性美籃混合經化學作用後，變成中性之伊紅化美藍，久置後，經氧化而含有天青。
此三種染料分別和細胞核及漿中的NH3+和COO-等結合，使細胞核及胞漿著色。
由於系中性染料，又有緩衝液調節酸鹼度，所以細胞受染後，藍紅等顏色都較適中，核染質、胞漿及其中之顆粒顯色較為清楚。
中文名稱瑞氏染色外文名稱Wright'sstain本 質染色劑又 稱美藍-伊紅Y瑞氏染料由酸性染料伊紅（E-）和鹼性染料亞甲藍（M+）組成。
伊紅通常為鈉鹽，有色部分為陰離子。
亞甲藍（又名美藍）為四甲基硫堇染料，有對醌型和鄰醌型兩種結構。
通常為氯鹽，即氯化美藍，有色部分為陽離子。
美藍容易氧化為一、二、三甲基硫堇等次級染料（即天青）。
將適量伊紅、美藍溶解在甲醇中，即為瑞氏染料。
甲醇的作用：一是溶解美藍和伊紅；二是固定細胞形態。
染色原理既有物理的吸附作用，又有化學的親和作用。
各種細胞成分化學性質不同，對各種染料的親和力也不一樣。
如血紅蛋白、嗜酸性顆粒為鹼性蛋白質，與酸性染料伊紅結合，染粉紅色，稱為嗜酸性物質；細胞核蛋白、淋巴細胞、嗜鹼性粒細胞胞質為酸性，與鹼性染料美藍或天青結合，染紫藍色或藍色，稱為嗜鹼性物質；中性顆粒呈等電狀態與伊紅和美藍均可結合，染淡紫紅色，稱為嗜中性物質、原始紅細胞、早幼紅細胞胞質、核仁含較多酸性物質，染成較濃厚的藍色；中幼紅細胞既含酸性物質，又含鹼性物質，染成紅藍色或灰紅色；完全成熟紅細胞，酸性物質徹底消失後，染成粉紅色。
瑞氏染液配製(1)瑞氏染液配製瑞氏染料830gm或1g甲醇（AR）500ml或600ml先稱乾燥（事先放入溫箱乾燥過夜）瑞氏染料放置乳缽內，用乳棒輕輕敲碎染料成粉末，再行研磨至聽不到研芝麻聲即呈細粉末，加少許甘油或甲醇溶解研磨，使染料在乳缸內顯“一面鏡”光澤，而無染料粉粒沉著，再加較多量甲醇研磨呈一面鏡光亮，靜置片刻，將上層液體倒入一清潔儲存瓶內（最好用甲醇空瓶），再加甲醇研磨，重複數次，直至乳缽內染料及甲醇用完為止，搖勻，密封瓶口，存室溫暗處，儲存愈久，則染料溶解、分解就越好，一般儲存3個月以上為佳。
(2)緩衝液1)緩衝液作用：染色對氫離子濃度是十分敏感的，據觀察pH值的改變，可使蛋白質與染料形成的化合物重新離解。
緩衝液須保持一定的pH使染色穩定，PBS的pH一般在6.4~6.8，偏鹼性染料可與緩衝液中酸基起中和作用，偏酸性染料則與緩衝液中的鹼基起中和作用，使pH恆定。
2)緩衝液配製（pH6.4~6.8，弱酸性）：配方1：配方2：1%KH2PO430mlM/15KH2PO473.5ml1%Na2HPO420mlM/15Na2HPO426.5mlH2O(新鮮)加至1000ml置室溫黑暗處，瓶口密封，防止黴菌污染，如有污染則應報廢。
pH的影響（pH6.4～pH6.8）細胞各種成分均屬蛋白質，因蛋白質系兩性電解質，所帶電荷隨溶液pH而定，在偏酸性環境中正電荷增多，易與伊紅結合，紅細胞和嗜酸性粒細胞染色偏紅，細胞核呈淡藍色或不染色；在偏鹼性環境中負電荷增多，易與美藍結合，所有細胞呈灰藍色，顆粒呈深暗，嗜酸性顆粒呈暗褐，甚至棕黑色，中性顆粒偏粗，呈紫黑色。
稀釋染液必須用緩衝液，沖洗用水應近中性，否則可導致細胞染色呈色異常，形態難以識別，甚至錯誤。
染色方法和注意事項（1）血塗片乾透後固定，否則細胞在染色過程中容易脫落。
（2）沖洗時應以流水沖洗，不能先倒掉染液，防染料沉著在血塗片上。
沖洗時間不能過久，以防脫色。
如血塗片上有染料顆粒沉積，可滴加甲醇，然後立即用流水沖洗。
（3）染色過淡可以復染，復染時應先加緩衝液，然後加染液。
染色過深可用流水沖洗或浸泡，也可用甲醇脫色。
（4）瑞氏染色Ⅰ液由瑞氏染料、甲醇（AR級以上）和甘油組成，Ⅱ液為PBS（pH6.4～pH6.8）。
相關詞條吉姆薩染色巴氏桿菌漏出液管型中性粒細胞核左移口腔上皮細胞甲苯胺藍壞死半抗原APTT白細胞計數異型淋巴細胞李凡它試驗革蘭氏染色法白細胞嗜鹼性粒細胞嗜酸性粒細胞紅細胞沉降率血沉(ESR)流式細胞儀